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硅胶的活性
主要影响碱性化合物的保留行为:k',生产硅胶时处理温度不同,硅胶活性也不同,是选择性差异的主要来源,硅胶的杂质含量,重金属含量低,硅羟基活性小,拖尾减小,是色谱柱质量好坏的重要标志,填料的稳定性,硅胶填料,pH:2-8,聚合物填料,pH:2-12,pH值小于2时,键合相水解,液相色谱法能否将某一样品完全分离,主要取决于色谱柱的选择性和柱效,这在很大程度上取决于固定相的选择是否适当。
6)色谱柱的规格:内径、检测的灵敏度、样品的容量
长度、分离度,理论塔板数、速度、样品的容量、检测的灵敏度
7)柱性能评价:购买的色谱柱,使用前都要对其性能进行考察,使用期间或放置一段时间后也要重新检查。柱性能指标包括在一定实验条件下(样品、流动相、流速、温度)下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性,或分离度。一般说来容量因子和选择性因子的重复性在±5%或±10%以内。进行柱效比较时,还要注意柱外效应是否有变化。
一份合格的色谱柱评价报告应给出柱的基本参数,如柱长、内径、填料的种类、粒度、色谱柱的柱效、不对称度和柱压降等。